Bazat e kulturave të tharjes së ngrirjes (liofilizimi)
Liofilizimi, i njohur edhe si tharje me lëng frutash, është një proces i përdorur për ruajtjen e materialit biologjik duke hequr ujin nga mostra, që përfshin së pari ngrirjen e mostrës dhe pastaj tharjen, nën një vakum, në temperatura shumë të ulëta. Mostrat e lyofilizuar mund të ruhen më shumë se mostrat e patrajtuara.
Pse përdoret Lyophilization
Liofilizimi, ose tharja e ngrirjes së kulturave bakteriale , stabilizon kulturat për ruajtjen afatgjatë, duke minimizuar dëmet që mund të shkaktohen duke tharë në mënyrë strikte kampionin.
Shumë mikroorganizma mbijetojnë mirë kur lyophilized dhe mund të rehydrated lehtë dhe rritur në media kulturës, pas periudhave të zgjatur kohe në ruajtje.
Liofilizimi përdoret gjithashtu në industrinë bioteknologjike dhe biomjekësore për të ruajtur vaksinat, mostrat e gjakut, proteinat e pastruara dhe materiale të tjera biologjike.
Kjo procedurë e shkurtër laboratorike mund të përdoret me çdo tharëse të ngrirjes në dispozicion në treg për të ruajtur koleksionin tuaj të kulturës.
Procesi i Lyofilizimit
Procesi i liofilizimit është në fakt një aplikim i një dukurie fizike të quajtur sublimim: tranzicioni i një substance nga ngurta në një gjendje të gaztë, pa kaluar së pari nëpër fazën e lëngshme. Gjatë lyophilization, uji në mostrën e ngrirë është hequr si avujt e ujit, pa shkrirjen e parë të mostrës.
Gabime të përbashkëta
Një nga gabimet më të shpeshta kur bëhet fjalë për liofilizim nuk është të dish pikën e shkrirjes së mostrës suaj, gjë që e bën të vështirë zgjedhjen e lyofilizuesit korrekt.
Mostrat e juaj mund të shkrihen gjatë procesit. Një tjetër gabim i zakonshëm është të mendosh që ftohti është më i mirë kur thahen ngrirje në një tharëse të ngrirësit të llojit të raftit. Gjatë tharjes primare, duhet të vendosni temperaturën e raftit vetëm nën temperaturën eutektike të mostrës. Duhet të ketë vetëm nxehtësi të mjaftueshme për të inkurajuar molekulat e mostrës për të lëvizur - por parandalimin e shkrirjes.
Një gabim i tretë është përdorimi i pajisjeve të gabuara për mostrat tuaja. Për shkak se tharësit e ngrirjes përdoren në vendosjen e grupit, duhet të dini më poshtë para se të bleni një:
- Sa lagështi do të lyofilizohet
- Çfarë mostra është (dhe temperatura eutektike)
- Si të përdorni si duhet tharësin e ngrirjes
Nëse njësia nuk përdoret si duhet, mund të shkatërrojë të gjitha mostrat. Cili na sjell në një gabim tjetër të përbashkët: Mos mbajtja e pompës së vakumit. Pompë duhet të jetë në gjendje të shkëlqyeshme pune për lyofilizimin të punojë. Drejtimi i pompës me balastin e gazit të hapur 30 minuta para dhe pas procesit të ngrirjes së thatë do të rrisë jetën e pompës. Hapja e çakëllit të gazit pastron ndotësit nga pompë për të parandaluar dëmtimin e komponentëve të brendshëm. Ju duhet të kontrolloni vajin e pompës shpesh për njollë dhe grimca dhe ta ndryshoni vajin sipas nevojës. Ndryshimet e rregullta të naftës e mbajnë pompën tërhequr në vakumin optimal gjatë procesit të ngrirjes së thatë.
Së fundi, të kesh ngrirjen e gabuar që thahen pajisje për procesin e lyofilizimit mund të jetë gjithashtu një gabim i madh. A keni nevojë për një mostër të ndaluar nën vakumin tuaj? Pastaj kërkohet një dhomë ndalimi. A jeni ngrirje-tharje në flasks? Pastaj sigurohuni që të keni një dhomë tharje me porte.
Duke shmangur gabimet e mësipërme, ju mund të siguroni kujdes më të mirë për tharësit tuaj të ngrirjes dhe pompën, dhe të keni mostra më të mira kur të bëhet tharja juaj e ngrirjes.
Referencat
Labconco News. "Top 5 gabime të bëra në procesin e liofilizimit." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes