Matja e Kinetikës së Enzimës
Si një sfond, enzimat janë proteina që veprojnë si katalizatorë në reduktimin e sasisë së energjisë së aktivizimit për një reaksion të ndodhë. Energjia e aktivizimit është energjia që kërkohet për të marrë "reagime", pasi shumë reaksione nuk ndodhin shumë shpejt (ose ndodhin fare) nëse ato janë termodinamike të mundshme.
Enzimat katalizojnë reaksione specifike në një vend të caktuar (i njohur si vendi aktiv) ku reaguesit lidhen dhe reagojnë për të gjeneruar prodhimet. Nënshtresat kanë vende aktive që janë specifike vetëm për ta në mënyrë që asnjë substancë tjetër të mos lidhë ose të reagojë në të njëjtën faqe. Ashtu si një çelës dhe çelës, secili enzimë do të katalizojë vetëm një reagim specifik (me disa përjashtime).
Aktiviteti specifik është përdorur në metodat e izolimit të proteinave për të treguar përqindjen e pastrimit. Është e rëndësishme të dini këtë njësi gjatë blerjes së enzimeve për të treguar saktësisht se sa nga enzimat e pastra që po merrni.
Kur matet kinetika enzimatike (shkalla e reagimit të një enzimi me një substrat - ose sipërfaqe), aktiviteti specifik përcaktohet si sasia e substratit të konvertuesve të enzimeve (reaksionet e katalizuar), për proteinë mg në përgatitjen e enzimës, për njësi të kohës.
Një shembull i aktivitetit specifik do të ishte:
- Aktiviteti specifik i enzimes së izoluar është matur në 150 umoles / min / mg proteina para pastrimit dhe 800 umoles / min / mg, pas pastrimit.
Aktiviteti specifik është një masë e rëndësishme e pastërtisë së enzimeve. Grumbuj të ndryshëm të një enzime të pastër duhet të kenë të njëjtat vlera dhe madje edhe diluting një zgjidhje enzimë shumë herë do të ketë vlera identike specifike të aktivitetit edhe pse do të ketë vlera të ndryshme të aktivitetit enzimë. Kjo është për shkak se në llogaritjen e aktivitetit specifik, numëruesi (njësitë / ml) dhe emëruesi (mg / ml) preken në mënyrë të barabartë.
Aktiviteti specifik është shumë i ndryshëm nga aktiviteti, por llogaritja e aktivitetit specifik është ende e varur nga vlera e aktivitetit. Kjo do të thotë se vlera specifike e aktivitetit të përcaktuar gjithashtu do të varet nga përkufizimi i njësisë enzimë.
Grumbullimet e enzimeve që kanë vlera më të ulëta se vlera specifike të aktivitetit mund të përmbajnë molekulat enzimë që janë ndryshuar ose të përziera me papastërtitë.
Faktorët që ndikojnë në aktivitetin enzimë
Është e mundur që një enzimë mund të ketë vlera të ndryshme të matura të aktivitetit kur matet në laboratorë të ndryshëm (dmth. Dallimet reale në aktivitetin e matur, dallimet e dukshme të shkaktuara nga përdorimi i përkufizimeve të njësive të ndryshme).
Mënyra se si kryhet një analizë (metoda e testimit për të përcaktuar pastërtinë e enzimeve) do të ndikojë në vlerat e raportuara të aktivitetit. Për shembull, enzimat janë përgjithësisht më aktive mes temperaturave prej 37 gradë Celsius në krahasim me 20 gradë Celsius, kështu që nëse një analizë kryhet në 21 gradë Celsius, vlerat do të ndryshojnë nga analizat e kryera në një temperaturë prej 32 gradë Celsius (zakonisht , analizat kryhen në një temperaturë midis 20-37 gradë Celsius).
Kështu, përkufizimi i njësisë enzimë do të shpjegohet më mirë pasi që një njësi (U) është sasia e enzimës që katalizon reagimin e 1 nmol substrate për minutë në kushte standarde.