Ky modul përdoret për të studiuar Lëvizjen e ADN-së
Ky tampon ka një forcë të ulët jonike dhe një kapacitet të ulët buffering. Ai është më i përshtatshmi për elektroforezën e pjesëve të mëdha të ADN-së (> 20 kb) dhe do të duhet të zëvendësohet shpesh ose të rikrijohet për më shumë kohë (> 4 orë) të xhelit.
Me këtë në mendje, ju mund të dëshironi të merrni në konsideratë disa pjesë të tamponës.
Duke pasur parasysh se tamponja është e lehtë për t'u bërë dhe hapat mund të kryhen shpejt, duke bërë më shumë se një pjesë në të njëjtën kohë nuk duhet të jetë veçanërisht kohë ose vështirë për t'u tërhequr. Duke përdorur udhëzimet më poshtë, ajo duhet të marrë vetëm 30 minuta për të bërë tampon TAE. Ja se si:
Përgatitni një Solution Stock të EDTA
Një zgjidhje EDTA (etilenediamine tetraacetic acid) është përgatitur përpara kohe. EDTA nuk do të shkojë krejtësisht në një zgjidhje derisa pH të përshtatet në rreth 8.0. Për një zgjidhje të aksioneve prej 500 mililitare të 0.5 M EDTA, peshoni 93.05 gram kripë dinatriumi EDTA (FW = 372.2). Shpërndani në 400 ml ujë deionizuar dhe rregulloni pH me hidroksid natriumi (NaOH). Bëni një zgjidhje deri në një volum përfundimtar prej 500 mililitra.
Bëj një zgjidhje të aksioneve të TAE
Bëni një solucion të koncentruar (50x) të TAE duke peshuar 242 gram të bazës Tris (FW = 121.14) dhe duke e shpërndarë atë në rreth 750 ml ujë deionizuar.
Shtoni me kujdes 57.1 mililitra acid akullnajor dhe 100 ml 0.5 M EDTA (pH 8.0). Pas kësaj, rregulloni zgjidhjen në një vëllim përfundimtar prej 1 litërsh. Kjo zgjidhje e stokut mund të ruhet në temperaturën e dhomës. PH e këtij tampon nuk është e rregulluar dhe duhet të jetë rreth 8.5.
Përgatitni një Zgjidhje të Punës të TAE
Zgjidhja e punës e tampon 1x TAE është bërë nga thjesht holluar zgjidhje të aksioneve me 50x në ujë deionized.
Përqendrimet finale solute janë 40 mM. Tris-acetat dhe 1 mM EDTA. Tampon tani është gati për përdorim në drejtimin e një xhel agaroze.
Çfarë keni nevojë për Buffer
Meqenëse bërja e tamponit TAE kërkon vetëm një sërë udhëzimesh të shpejtë dhe të thjeshtë, numri i materialeve të nevojshme për të nuk është i tepruar. Ju do të duhet vetëm kripë EDTA dinatriake, bazë Tris, dhe acid acetik glaciális.
Marrja e tamponës gjithashtu kërkon një matës pH dhe standardet e kalibrimit, sipas rastit. Ju gjithashtu do të nevojiten 600 mililitra dhe 1500 mililitarë beakers ose flasks, si dhe cilindra diplomuar. Së fundi, ju do të nevojitet ujë deionized, stir bare, dhe llokoçis pllaka.
Duke përfunduar
Ku planifikoni të bëni tampon - në një vend të shkollës, një vend pune ose një vend tjetër, siç është shtëpia juaj? Kontrolloni inventarin para se të filloni të siguroheni që të keni të gjitha materialet e mësipërme për tamponin TAE.
Nëse nuk do të duhej të paguheshin për materiale, rekomandohej të vendosësh tampon jashtë shtëpisë tënde. Ju lehtë mund të porositni materialet që ju nevojiten në internet ose vizitoni një dyqan specialiteti për ta.